HvVRN1 cv Strider ACCTATACATACTTAAGAGTAAAACAGAAGTTATGTCTAGGAATATCCAGCTAAGCTATGGGATAGTCAA

HvVRN1 cv Express ACCTATACATACTTAAGAGTAAAACAGAAGTTATGTCTAGGAATATCCAGCTAAGCTATGGGATAGTCAA

vrn-A1 TDC ACCTATA--TACTTGAGAGTAAAACAGAAGTTATTCCTAGGAATATCTGACTAAGCTATGGGATAGTCAA

vrn-B1 TDC ACCTATA--TACTTAAGAGTAAAACAGAAGTTATGCCTAGGAATATCTGACTAAGCTATGGGATAGTCAA

vrn-D1 TDC ------A--TACTTAAGAGTAAAACAGAAGTTATGCCTAGGAATATCTGACTAAGCT------

vrn-B1T.turgidum ACCTATA--TACTTAAGAGTAAAACAGAAGTTATGCCTAGGAATATCTGACTAAGCTATGGGATAGTCAA

vrn-D1A.tauschii ------A--TACTTAAGAGTAAAACAGAAGTTATGCCTAGGAATATCTGACTAAGCT------

vrn1T.monococcum ACCTATA--TACTTGAGAGTAAAACAGAAGTTATTCCTAGGAATATCTGACTAAGCTATGGGGTAGTCAA

HvVRN1 cv Strider CTTCCATTTTCTTTCTCCTTCCACGTCTTTACTCAGTTCACAAACAATGTATAGACGATCAGCCAGAGCC

HvVRN1 cv Express CTTCCATTTTCTTTCTCCTTCCACGTCTTTACTCAGTTCACAAACAATGTATAGACGATCAGCCAGAGCC

vrn-A1 TDC CTTCCATTTT--TGCTCCTGCCACATCTTTACTTAGTCCACAAACGACATATAGATGATCAGCTAGAACC

vrn-B1 TDC CTTTCATTTT--TGCTCCTGCCACATCTTTACTTAGTCCACAAATGACATATAGACAATCACCTAGAACC

vrn-D1 TDC -TCCATTTCT--TGCTCCTGCCACATCTTTACTTAGTCCACAAACGACATATAGACAATCACCTAGAACC

vrn-B1T.turgidum CTTTCATTTT--TGCTCCTGCCACATCTTTACTTAGTCCACAAATGACATATAGACAATCACCTAGAACC

vrn-D1A.tauschii -TCCATTTCT--TGCTCCTGCCACATCTTTACTTAGTCCACAAACGACATATAGACAATCACCTAGAACC

vrn1T.monococcum CTTCCATTTT--TGCTCCTGCCACATCTTTACTTAGTCCACAAACGACATATAGATGATCAGCTAGAACC

HvVRN1 cv Strider GTTATTTAGACTTTAT--CTGCTCACTACATGTATTAATTCCATGAAATAGAGGAAA--CTCAATAGGCA

HvVRN1 cv Express GTTATTTAGACTTTAG--CTGCTCACTACATGTATTAATTCCATGAAATAGAGGAAA--CTCAATAGGCA

vrn-A1 TDC GTTATTTAGAGTTTATATCTGCTCATTACATGTATTAATTCCATGAAATAGAAGAAAAACTGAATAGGCA

vrn-B1 TDC ATTATTTAGACTTTATATCTGCTCATTACATGTATTAAATCCATGAAATAGAGGAAG--CTGAATAGGCA

vrn-D1 TDC GTTATTTAGACTTTATATCTGCTCATTACATGTATTAAATCCATGAAATAGTGGAAG--CTGAATAGGCA

vrn-B1T.turgidum ATTATTTAGACTTTATATCTGCTCATTACATGTATTAAATCCATGAAATAGAGGAAG--CTGAATAGGCA

vrn-D1A.tauschii GTTATTTAGACTTTATATCTGCTCATTACATGTATTAAATCCATGAAATAGTGGAAG--CTGAATAGGCA

vrn1T.monococcum GTTATTTAGAGTTTATATCTGCTCATTACATGTATTAATTTCATGAAACAGAAGAAAAACTGAATAGGCA

HvVRN1 cv Strider TACAATATAGTTGAAGCTTGGTAGATGCTTTTAACCGTGCGAGATGACGTAATAAGCGTCATATCTATTA

HvVRN1 cv Express TACAATATAGTTGAAGCTTGGTAGATGCTTTTAACCGTGCGAGATGACGTAATAAGCGTCATATCTATTA

vrn-A1 TDC CACAATATAGTTGAAGCTCGGCAGATG------ACTTCATAAGTGTCATATCTATTA

vrn-B1 TDC TACAATATAGTTGAAGCTCGATAGATG------ACTTAATAAGTGTCATATCCATTA

vrn-D1 TDC TACGATATAGTTGAAGCTCGACAGATG------ACTTAATAAGTGTCATATCTATTA

vrn-B1T.turgidum TACAATATAGTTGAAGCTCGATAGATG------ACTTAATAAGTGTCATATCCATTA

vrn-D1A.tauschii TACAATATAGTTGAAGCTCGACAGATG------ACTTAATAAGTGTCATATCTATTA

vrn1T.monococcum CACAATATAGTTGAAGCTCGGCAGATG------ACTTAATAAGTTTCATATCTATTA

HvVRN1 cv Strider TAACCATTTCACATATTGTTACATTTTTGCTACAGTGATATTTTGCTAGCTCCCAGACTCCCAGTTGCAA

HvVRN1 cv Express TAACCATTTCACATATTGTTACATTTTTGCTACAGTGATATTTTGCTAGCTCCCAGACTCCCAGTTGCAA

vrn-A1 TDC --ACCATTTCACATATTGTTACATTTTTGCTGCAGTGATATTTTGTTAGCTCCCAG------TTACAA

vrn-B1 TDC --ACCATTTCACATATTTTTACATTTTTGCTGCAGTGATATTTTGCTAGCTCCCAG------TTACAA

vrn-D1 TDC --ACCATTTCACATATTTTTACATTTTTGCTGCAGTGATATTTTGCTAGCTCCCAG------TTACAA

vrn-B1T.turgidum --ACCATTTCACATATTTTTACATTTTTGCTGCAGTGATATTTTGCTAGCTCCCAG------TTACAA

vrn-D1A.tauschii --ACCATTTCACATATTTTTACATTTTTGCTGCAGTGATATTTTGCTAGCTCCCAG------TTACAA

vrn1T.monococcum --ACCATTTCACATATTGTTACATTTTCGCTGCAGTGATATTTTGTTAGCTCCCAG------TTACAA

HvVRN1 cv Strider GTTAACTAATACTCCTAGTATATGGAGATCCTGTGCACATAAATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

HvVRN1 cv Express GTTAACTAATACTCCTAGTATATGGAGATCCTGTGCACATACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

vrn-A1 TDC GTTAACTAATA------TATGGAGATCCTGGGCACGTACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTTCGTG

vrn-B1 TDC GTTAATTAATA------TATGGAGATCCTGGGCACGTACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

vrn-D1 TDC GTTAACTAATA------TATGAAGATCCTGGGCACGTACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

vrn-B1T.turgidum GTTAATTAATA------TATGGAGATCCTGGGCACGTACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

vrn-D1A.tauschii GTTAACTAATA------TATGAAGATCCTGGGCACGTACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

vrn1T.monococcum GTTAACTAATA------TATGGAGATCCTGGGCACGTACATGTAAGCAGATCCTATCGACTTCCGTG

HvVRN1 cv Strider GATCCCTTGATGGAATCGC-TCTCAGGATTTCAAGGCATAGTCTTGATATGTTACGAACTAGTTTTTAGT

HvVRN1 cv Express GATCCCTTGATGGAATCGC-TCTCAGGATTTCAAGGCATAGTCTTGATATGTTACGAACTAGTTTTTAGT

vrn-A1 TDC GATCCGCTGATGGAATCACACCTCAGGATTTCATGGCATAGTCTTGATATGTCACGAACTGGTTGTTACT

vrn-B1 TDC GATCCGCTGATGGAATCGC-CCTCAGGATTTCATGGCATAGTCTTGATATGTCACGAATTAGTTGTTAGT

vrn-D1 TDC GATCCGCTGATGGAATCGC-CCTCAGGATTTCACGGCATAGTCTTGATATGTCACGAACTAGTTGTTAGT

vrn-B1T.turgidum GATCCGCTGATGGAATCGC-CCTCAGGATTTCATGGCATAGTCTTGATATGTCACGAATTAGTTGTTAGT

vrn-D1A.tauschii GATCCGCTGATGGAATCGC-CCTCAGGATTTCACGGCATAGTCTTGATATGTCACGAACTAGTTGTTAGT

vrn1T.monococcum GATCCGCTGATGGAATCGCACCTCAGGATTTCATGGCATAGTCTTGATATGTCACGAACTGGTTGTTAGT

HvVRN1 cv Strider TTATTTATTTATTTTACACTGTGTTTTGCCCATCTA-GATGATAGAAATGTTATGTATTTAAAATGTAAC

HvVRN1 cv Express TTGTTTATTTATTTTACACTGTGTTTTGCCCATCTA-GATGATAGAAATGTTATGTATTTAAAATGTAAC

vrn-A1 TDC TTATTTATTTATTTTACACTGTG-TTCGCCCACCCA-GATGACAGAAATGTTATGTATTTAAAATGTAAT

vrn-B1 TDC TTATTTATT---TTTACATTGAGCTTTGCCCATCCAAGATGATAGAAATGTTATGTATTTAAAATGTAAT

vrn-D1 TDC TTATTTATTTATTTTACACTGTGCTTTGCCCATCCA-GATGATAGAAGTGTTATGTATTTAAAATGTAAT

vrn-B1T.turgidum TTATTTATT---TTTACATTGAGCTTTGCCCATCCAAGATGATAGAAATGTTATGTATTTAAAATGTAAT

vrn-D1A.tauschii TTATTTATTTATTTTACACTGTGCTTTGCCCATCCA-GATGATAGAAGTGTTATGTATTTAAAATGTAAT

vrn1T.monococcum TTATTTATTTATTTTACACTGTG-TTCGCCCACCTA-GGTG------TATTTAAAATGTAAT

HvVRN1 cv Strider CTCATGGTCATTGTTATTAAGGTATTGATCATATGCCAAAAAGG------GGTAGTCTATTGATGAA

HvVRN1 cv Express CTCATGGTCATTGTTATTAAGGTATGGATCATATGCCAAAAAGG------GGTAGTCTATTGATGAA

vrn-A1 TDC CTCACAGTCATTGTTGTT--GGTATGGACCGTATGCCAAAAAGGGTTTTACCATGAAGTCTATTAATGAA

vrn-B1 TDC CTCACAGTCATTGTTGTT--GGTATGGATCGTATGCCAAAAATG-TTTTACCATGAAGTCTATTAATGAA

vrn-D1 TDC CTCACAGTCATTGTTGTT--GGTATGGATCGTATGTCAAAAAGGGTTTTACCATGAAGTCTATTAACGAA

vrn-B1T.turgidum CTCACAGTCATTGTTGTT--GGTATGGATCGTATGCCAAAAATG-TTTTACCATGAAGTCTATTAATGAA

vrn-D1A.tauschii CTCACAGTCATTGTTGTT--GGTATGGATCGTATGTCAAAAAGGGTTTTACCATGAAGTCTATTAACGAA

vrn1T.monococcum CTC--AGTCATTGTTGTT--GGTATGGATCGTATGCCAAAAAGGGTTTTACCATGAAGTCTATTAATGAA

HvVRN1 cv Strider GAATTATTTATGTTACAACTTTATTGCTTTACATTAGTGAAAAATAATTATTTTTGTTCTTT------

HvVRN1 cv Express GAATTATTTATGTTACAACTTTATTGCTTTACATTAGTGAAAAATAATTATTTTTGTTCTTT------

vrn-A1 TDC TAATTATTTATGTTACAACTTGATTGCTTTACATTAGTTAAAATTAGTTATTTTGTACCTTTGTGCCCCC

vrn-B1 TDC GAAT-ATTTATGTTACAACTTTCTTGCTTTACGTTAGTTAAAATTGGTAATTTTGTTTCTTTGTGCCCCC

vrn-D1 TDC GGATTATTTATGTTACAACTTTATTGCTTTACATTAGTTAAAATTAGTTATTTTGTTCCTTTGTGCCCCC

vrn-B1T.turgidum GAAT-ATTTATGTTACAACTTTCTTGCTTTACGTTAGTTAAAATTGGTAATTTTGTTTCTTTGTGCCCCC

vrn-D1A.tauschii GGATTATTTATGTTACAACTTTATTGCTTTACATTAGTTAAAATTAGTTATTTTGTTCCTTTGTGCCCCC

vrn1T.monococcum TAATTATTTATGTTACAACTTGATTGCTTTACATTAGTTAAAATTAGTTATTTTGTACCTTTGTGCCCCC

HvVRN1 cv Strider ------TATCTAACCGGACTATTGAGCAACACACATGCATAGTCACTATTCATAAATTT

HvVRN1 cv Express ------TATCTAACCGGACTATTGAGCAACACACATGCATAGTCACTATTCATAAATTT

vrn-A1 TDC CTTCTTGTTCAACCATTTATCTTACCAAACTATGCATCAACAAACATGCACAGTCACTATTCATAAATTT

vrn-B1 TDC CTTCTTGTACAACCATTTATCTTACCAAACTATGCAGCAACAAATATGCACAGTCTCTATTCACGAATTT

vrn-D1 TDC CTTCTTGTACAACCATTTATCTTACCAAACTATGCAGCAACAAACATGCACAGTCACTATTCATGAATTT

vrn-B1T.turgidum CTTCTTGTACAACCATTTATCTTACCAAACTATGCAGCAACAAATATGCACAGTCTCTATTCACGAATTT

vrn-D1A.tauschii CTTCTTGTACAACCATTTATCTTACCAAACTATGCAGCAACAAACATGCACAGTCACTATTCATGAATTT

vrn1T.monococcum CTTCTTGTTCAACCATTTATCTTACCAAACTATGCATCAACAAACATGCACAGTCACTATTCATAAATTT

HvVRN1 cv Strider CATATTTTAGAAATTTAAATATTAAGAATATGAATTATGTTTCTAGTTTTTTCAACT------TTGTTTC

HvVRN1 cv Express CATATTTTAGAAATTTAAATATTAAGAATATGAATTATGTTTCTAGTTTTTTCAACT------TTGTTTC

vrn-A1 TDC CATATTCTCAAAATTTAAATATTAAGAACAAAAGTTATGTTTCTACTTTTTCCAACTAACAATTCTCTGA

vrn-B1 TDC CATATTCCCAAAAGTTAAATATTAAGAACAAAAGTTATGTTTCTACTTTTTCCAACTCATAATTTTCTGA

vrn-D1 TDC CATATTCTCAAAAGTTAAATATTAAGAACAAAAGTTATGTTTCTACCTTTTCCAACTCATAATCTTCTGA

vrn-B1T.turgidum CATATTCCCAAAAGTTAAATATTAAGAACAAAAGTTATGTTTCTACTTTTTCCAACTCATAATTTTCTGA

vrn-D1A.tauschii CATATTCTCAAAAGTTAAATATTAAGAACAAAAGTTATGTTTCTACCTTTTCCAACTCATAATCTTCTGA

vrn1T.monococcum CATATTCTCAAAATTTAAATATTAAGAACAAAAGTTATGTTTCTACTTTTTCCAACTGACAATTCTCTGA

HvVRN1 cv Strider ATTCTAATCTTTTGAAC

HvVRN1 cv Express ATTCTAATCTTTTGAAC

vrn-A1 TDC ACTCAAATTTTATAATT

vrn-B1 TDC ACTCAAATTTTATAATC

vrn-D1 TDC ACTCAAATTTTATAATC

vrn-B1 T.turgidum ACTCAAATTTTATAATC

vrn-D1 A.tauschii ACTCAAATTTTATAATC

vrn1 T.monococcum ACTCAAATTTTATAATT

Supplementary Figure 2. Alignment of nucleotide sequence from wildtype barley and wheat VRN1 alleles for the 1 kb region of intron 1 that is associated with repression of HvVRN1in non-vernalized plants. Short AT-rich motifs associated with Scaffold/Matrix Attachment Regions (S/MARs) are underlined. The S/MAR ‘A-box’ motif predicted by the PLACE database and SignalScan algorithm is underlined and in italics.